有人认为退火温度应小于或等于共熔温度，因为在此温度才更有利于重结晶，而有的重结晶现象可以直接在热分析图谱中直接看到。因此DSC热分析是研究退火条件的重要手段。甘露醇/蛋白溶液DSC分析曲线退火维持时间，应该由溶质的结晶性质，退火的温度和装载高度等诸多因素决定，因此目前还没有合适的数学模型。

众说纷纭，那么可由实验确定Z佳的退火时间，如蔗糖在-14℃退火30min，能显著提高升华效率，而要达到相似的效率，必须在-25℃退火更长的时间。对于常规的保护剂甘露醇或甘氨酸，如果充填高度度为1cm或更大，则建议温度为-20或-25℃，退火时间为2h或更长，甘露醇/蛋白溶液DSC分析曲线所示。另外可以借助仪器如使用X射线衍射或DSC来研究退火条件以评估结晶度的发展。